jueves, 24 de noviembre de 2016

PRUEBA PARA VIH ( TAMIZAJE POR INMUNOCROMATOGRAFIA )

la mayoria de los pacientes con SIDA tienen anticuerpos para las proteinas estructurales del virus de VIH es mas una proporcion de miembros de grupos de alto riesgo clinicamente saludables  como los homosexuales , hemofilicos o adictos a las drogas son tambien seropositivos. la infeccion por VIH se diagnostica mediante la deteccion de anticuerpos especificos para el virus . actualmente se conocen dos tipos de VIH : VIH-1 y VIH-2

durante la prueba se aplican dos gotas suero plasma o sangre total del area de muestra seguido de dos gotas de buffer de lavado y se deja qeue reaccionen. los anticuerpos igG especificos para las proteinas recombinantes del VIH-1 y VIH-2 reaccionaran con los antigenos unidos a las particulas de oro coloidal .el complejo de oro coloidal anticuerpos se mueve cromatograficamente a traves de la membrana a las regiones de prueba y control del casete de prueba . una reaccion positiva se visualiza  por una banda de color rosa purpura

obtener la muestra por puncion venosa
centrifugar a 2500 rmp por 5 minutos  para obtener suero
marcar cada prueba  con la informacion del paciente
tomar 2 gotas de suero  utilizando la pipeta proporcionada en el equipo y colocarlas cuidadosamente en el area de prueba del casete


DIAGNOSTICO DE TREPONEMA PALLIDUM POR EL METODO DE VDRL

Se diagnostica mediante la demostración de organismos en una lesión primaria o secundaria. la serologia constituye el metodo de laboratorio mas comúnmente utilizado en el diagnostico de esta enfermedad.
la sifilis se basa normalmente en dos grupos generales de procedimientos en prueba de antigenos no treponemicos y la prueba de antígeno treponemico fluorescente
la reagina es una sustancia que aparece en la sangre esta sustancia flocula las emulsionesde una solucion alcoholica al 0.03% de cardiolipina
para esta prueba se necesita suero , placas  lavadas y desgrasadas  kit para determinar VDRL

PROCEDIMIENRTO
el suero obtenido por centrifugacion se calienta a 56 grados centigrados  durante 30 minutos  o a 62 grados centigrados  durante tres minutos
medir 0.05 mL de suero inactivado y colocarlo en la placa de vidrio añada una gota de emulsion de antigeno a cada suero
haga la rotacion de la placa durante 4 minutos

DETERMINACION DEL SISTEMA ABO METODO INVERSO

El sistema ABO es uno de los varios sistemas que sirven para identificar que tipo de sangre tiene, es decir, el tipo de sangre que usted tenga depende de si hay o no ciertas proteínas, llamadas antígenos en sus glóbulos rojos
El fundamento de esta practica es la identificación de los anticuerpos naturales del sistema ABO  se realiza utilizando antígenos conocidos A B y O  que al ponerlos en contacto   con el suero problema se manifiesta por medio de una aglutinación.

PROCEDIMIENTO
1.- rotular los tubos con el numero de la muestra y la letra de los eritrocitos correspondiente
2.-agregar dos gotas del suero del paciente (suero problema )a cada uno de los tubos
3.-agregar una gota de eritrocitos al 5% a cada tubo
4..-centrifugar a 1000 r.p.m por un minuto
5.- observar la aglutinación deben de mostrar contra quienes  actúa el antígeno

EJEMPLO:
grupo             aglutinacion            

A                    POSITIVO        
B                    POSITIVO
AB                 POSITIVO

El grupo sanguíneo del paciente es "O"


TITULACION DE ANTICUERPOS

La titulación de anticuerpos determina la presencia y la concentración  de anticuerpos en la sangre. El titulo de un anticuerpo, es la dilucion máxima en la que su presencia puede ser demostrada por aglutinación.
la razon por la que se hace esta practica es para encontrar anticuerpos específicos activos en el suero del paciente contra eritrocitos del donador i viceversa.

PROCEDIMIENTO 
1.- el tubo con sangre se centrifuga a 3500 r.p.m por 5 minutos para separar el suero de la sangre 
2.-se rotula 10 tubos numéricamente
3.- se les agrega 0.5 mL de solución salina a cada uno
4.- se le agrega 0.5mL de suero al primer tubo 
5.- de este primer tubo se obtiene 0.5 mL y se pasa el segundo tubo y así sucesivamente 
6.- en el ultimo tubo se obtiene el 0.5 mL y se desecha para obtener un balance en los tubos
7.-se coloca dos gotas de la suspensión del paquete celular contrario al tipo sanguíneo del paciente
8.- los tubos se colocan en una centrifuga a  1500 r.p.m por dos minutos
9.-de los botones obtenidos en los tubos después de la centrifuga; agitar suavemente para observar la aglutinación. proceder a realizar la lectura  

por ejemplo 

no. del tubo                                               titulación                                           aglutinacion 
1                                                                     1:2                                                   positivo     
2                                                                     1:4                                                   positivo     
3                                                                     1:8                                                   positivo     
4                                                                     1:16                                                 positivo     
5                                                                     1:32                                                 positivo     
6                                                                     1:64                                                 negativo    
7                                                                     1:128                                               negativo    
8                                                                     1:256                                               negativo    
9                                                                     1:512                                               negativo    
10                                                                   1:1024                                             negativo    









miércoles, 23 de noviembre de 2016

PRUEBA DE COOMBS

La prueba de coombs el suero permite establecer la presencia de globulina y también de anticuerpos , el suero de coombs es ideal  por que tiene anticuerpos contra las globulinas sericas humanas que abarcan  cuatro alfa 1  alfa 2 beta y gamma y dentro de estos grupos se encuentran anticuerpos  anti Rh anti-duffy anti-kell el suero de coombs se obtiene por inyecciones repetidas de sueros humanos grupo O a conejos el animal  sensibilizado produce anticuerpos contra la fracción globulinica de las proteínas sericas y contra anticuerpos incompletos.

PRUEBAS CRUZADAS

Las pruebas cruzadas  es una serie de pruebas que buscan interacciones perjudiciales entre la sangre de  un paciente y un donante  las pruebas se hacen antes de una transfucion sanguínea estas serie de pruebas se divide en 3  prueba mayor que contiene el suero del paciente y eritrocitos del donador , prueba menor  que contiene el suero del donador  y los eritrocitos del paciente y el autotestigo que contiene el suero  y eritrocitos del paciente



las pruebas cruzadas detectan reacciones ag-ac  antes de la transfucion. Esta prueba se realiza   por necesidad critica de sangre , intervenciones quirúrgicas , hemorragia aguda entre otros.

PRUEBA DE LA VARIANTE D (U)

                             

El factor Du es una variante del factor D, que tiene gran importancia en las pruebas de laboratorio porque es antigénica y es importante para saber si es compatible en las transfusiones de sangre, transplantes y embarazos, de tal manera que no haya problemas en el organismo de una persona.



  I. Incubar el tubo la muestra (que dio negativo en el Rh negativo de la determinación D)a 37º de 10 min
   2  Lavar los eritrocitos de la siguiente manera:
 3  Agregar 3 gotas de SSF y agitar suavemente para Resuspender los eritrocitos posteriormente llenar dos terceras partes del fondo con SSF procurando que quede una suspensión.
   4   Centrifugar a 3400 rpm por 3 min, decantar
   5Repetir tres veces el paso anterior, en el ultimo lavado decantar perfectamente.
  6  Agregar 2 gotas de suero de Coombs y mezclar
   7. Centrifugar  1000 rpm 1 min
   8 Resuspender suavemente el botón de eritrocitos del fondo y observar la aglutinación


DETERMINACIÓN DEL ANTÍGENO RH (D)

de la determinación del antígeno Rh  sirve para saber   si es positivo o negativo gracias al reactivo hemotipificador  anti-Rh  o D , gracias a la determinación del Rh  podemos evitar malas transfusiones  o cualquier otro problema que  tenga que ver con el , el Rh es una es una proteína integral de la membrana de los glóbulos rojos. El Rh positivo son aquellas personas que presentan dicha proteína en sus eritrocitos y Rh negativa quienes no presenten la proteína.  Solo uno de varios  métodos para determinación de grupos sanguíneos, Rh proviene del nombre macacus Rhesus.
procedimiento 
1.    Rotula los tubos con el número de muestra correspondiente
2.     Coloca una gota del suero hemotipificador Anti-D y para el control una gota de albumina al 22%
3.     problema a cada tubo.
4.     Centrifugar a 3400 rpm por 15 segundos o 1000 por 60 segundos
5.     Observa macroscópicamente las glutinaciones e informa mediante cruces
Agrega una gota de suspensión de eritrocitos al 5% de la muestra 

DETERMINACION DEL SISTEMA ABO METODO DIRECTO

La determinación del grupo sanguíneo es un método para indicarle cuál es el tipo de sangre que usted tiene. La determinación del grupo sanguíneo se realiza para que usted pueda donar sangre o recibir una transfusión de sangre de manera segura.  
El tipo de sangre que usted tenga depende de si hay o no ciertas proteínas, llamadas antígenos, en sus glóbulos rojos. Estas proteínas se llaman antígenos. Su tipo de sangre o grupo sanguíneo depende de qué tipos de sangre heredó de sus padres.
La sangre a menudo se clasifica de acuerdo con el sistema de tipificación ABO. Los cuatro tipos de sangre principales son: tipo A tipo B tipo AB tipo O.


 Si sus glóbulos rojos   aglutinan al mezclarse con:
Suero anti-A, usted tiene sangre tipo A.
Suero anti-B, usted tiene sangre tipo B.
Sueros anti-A y anti-B, entonces usted tiene sangre tipo AB.
Si los glóbulos sanguíneos no se pegan o aglutinan cuando se agrega suero anti-A y anti-B, usted tiene sangre tipo O



TIPIFICACION DEL SUBGRUPO DE "A "USO DE LECTINA A1

Al determinar un  grupo sanguíneo tipo A   se determinara  si es subgrupo tipo A1 o tipo A2  las células rojas de tipo A  que aglutinen con anti A1  Lectina se consideran  del subgrupo, aquellas que no aglutinen  con anti A1 Lectina se clasifican como A2  .


Procedimiento
1.     Preparar una suspensión de glóbulos rojos en solución salina al 5%
2.     Colocar una gota de Anti A Lectina en un tubo de 10x 75
3.     Con una pipeta Pasteur, agregar una gota de la suspensión de glóbulos rojos.
4.     Mezclar bien y centrifugar a 2500 r.p.m por un minuto.
5.   Resuspender los glóbulos rojos cuidadosamente y examinar el tubo en busca de aglutinación.


TÉCNICA DE FLEBOTOMIA

La transfusión sanguínea  es una parte muy importante de la práctica médica, la técnica, dentro de un  banco de sangre para realizar una flebotomía correctamente ,esta sirve para poder obtener transfusiones sanguíneas mediante bolsas transfusionales .

Procedimiento


Paso 1:
Arme la parte interna del sistema
Paso 2:
Fije el sistema al soporte de madera

Técnica de flebotomía usando bolsa fraccionaria de sangre.


1.     Revisarla bolsa fraccionaria
2.     Colóquese frente al paciente 
3.     Reconozca la vena sobre la cual va a realizar la punción
4.     Coloque el torniquete y aseptice la zona
a)     Jabón b)    Yodo c)     Alcohol
5.     Tome el sistemas de bolsas, antes de retirar el tapón de la bayoneta, realice un medio nudo en el tubo transportador
6.     Pince al inicio del tubo con unas pinzas antes de la punción.
7.     Introduzca la aguja en la vena
8.     En cuanto observe la sangre, retiré las pinzas y deje correr la muestra.
9.     Fije la aguja al brazo para evitar el movimiento.
10. En cada flebotomía el volumen de sangre extraído deberá de ser de 450 ml, con una variación de un 10%
11. Cuando la bolsa se llene, pince nuevamente el tubo transportador.
12. Apriete fuertemente el nudo del tubo transportador

13. Corte la bolsa.

martes, 22 de noviembre de 2016

HEMOGLOBINA Y HEMATOCRITO

El hematocrito es un metodo de varios simple y exacto ,este es necesario  para determinar los indices eritrocitarios  ( VGM, CMG y CMHC )  

La hemoglobina es una proteína en los glóbulos rojos que transporta oxígeno. 
El hematocrito es el porcentaje del volumen total de la sangre compuesta por glóbulos rojos. Los valores medios varían entre el 45 y el 55 % en los hombres, y entre el 36, y el 45 % en las mujeres, debido a la mayor musculatura y por ende mayor necesidad de oxígeno de los primeros. Estas cifras pueden cambiar de acuerdo con diversos factores fisiológicos, como la edad y la condición física del sujeto

 La hemoglobina y el hematocrito son métodos  con valores exactos, para determinar el conteo eritrocitaria  se necesitan parámetros, los índices de wintrobe.



en esta imagen podemos observar un lector de hematocrito y un lector de hemoglobina 








¿QUE ES UN BANCO DE SANGRE ?
Un banco de sangre  es una parte  derivada de un laboratorio clínico donde se almacenan  muestras sanguíneas extraídas de un donante, y son dirigidas a un receptor  que requiera de estas 


¿QUE ES LA SANGRE ?
la sangre es el tejido hematico con todos sus componentes( eritrocitos ,leucocitos y plaquetas ) que viajan a través de vasos sanguíneos


LA ELEVACIÓN DE CIERTAS LINEAS CELULARES RECIBE UN NOMBRE ESPECIFICO

linfocitos-linfocitosis
neutrofilos-neutrofilia
monocitos-monocitosis
basofilos-basofilia
eosinofilos-eosinofilia

ELEMENTOS BAJOS DE LA SANGRE SE LES DENOMINA
eritrocitos-anemia
leucocitos-leucopenia
trombocitos-trombocitopenia


TIPOS DE DONADORES
donador : sede la sangre propia a un disponente
autologo : sangre para su propio uso
regular :dona mas de una ves en el mismo lugar
repeticion: dona  2veces en 2 años
voluntario :  sede su sangre a voluntad propia
familiar: un familiar sede su sangre
designado: es el que va ordenado por un medico

para que un candidato  pueda ser donador primero debe de llenar una serie de documentos  para que le den valides oficial al procedimiento